استخراج الحمض النووي الريبي (RNA) والطرق المختلفة التي يمكن اتباعها في هذا الصدد. يعد الحمض النووي أحد أهم المعلومات لأنه يحتوي على جميع المعلومات الوراثية التي يمكن أن تتم بها عملية التكاثر لجميع الكائنات الحية. وبفضل هذا المقال سنوضح أهم المعلومات حول الحمض النووي واستخلاصه.

استخراج الحمض النووي الريبي

  • الحمض النووي مهم في خلايا الجسم لأنه يحمل عوامل وراثية. يعتبر استخراج الحمض النووي من أهم الطرق المستخدمة في مختبرات البيولوجيا الجزيئية. حصل عليها فريدريش ميشر لأول مرة عام 1869م.
  • وفي عام 1958 أيضًا، طور ستال وميليسون بروتوكولًا منظمًا لاستخراج الحمض النووي، والذي أطلقوا عليه اسم بروتوكول الطرد المركزي لتدرج الكثافة. هذا هو البروتوكول الأول الموصوف لفصل الحمض النووي عن البكتيريا الموجودة بداخله.
  • بمجرد جمع العينة البيولوجية، يتم استخدام عملية استخراج الحمض النووي الريبي (RNA) باستخدام الطرق الكيميائية والفيزيائية لتنقيته. ويمكن القيام بذلك عن طريق فصل البروتين وأغشية الخلايا وجميع المكونات الخلوية عن الحمض النووي.

إقرأ أيضاً:

خطوات استخراج الحمض النووي

يمكن استخراج الحمض النووي الريبي (RNA) باتباع 3 خطوات مهمة مطلوبة في عملية الاستخراج. وسنشرح هذه المراحل فيما يلي:

  • انحلال الخلية

تعتبر خطوة تحلل الخلية من أهم خطوات استخلاص الحمض النووي عن طريق تفتيت النواة.

  • تساقط

ولا يمكن إغفال هذه الخطوة لأنها إحدى الخطوات الأساسية لاستخراج الحمض النووي. وتكمن أهميتها في إزالة الشوائب والبروتينات من العينة قيد الفحص.

  • طهارة

وبعد اجتياز هذه الخطوة، يمكن الحصول على عينة حمض نووي نقية.

الاستخلاص الكيميائي للحمض النووي الريبي

  • يمكن استخدام المحاليل العضوية وغير العضوية المختلفة في الطريقة الكيميائية المستخدمة في استخلاص الحمض النووي. هناك أيضًا العديد من المواد الكيميائية التي يمكن استخدامها: الفينول، والكلوروفورم، وCTAB، وSDS، وكحول الأيزواميل، وتريس-EDTA.
  • تنقسم الطريقة الكيميائية للاستخلاص الكيميائي للحمض النووي إلى قسمين: من المذيبات العضوية ومن المذيبات العضوية. وفي طريقة استخلاص الحمض النووي من المواد العضوية، يتم استخدام الفينول أو الكلوروفورم أو كحول الأيزواميل.
  • يمكن أيضًا استخلاص الحمض النووي من المذيبات غير العضوية مثل طريقة البروتيناز وطريقة التمليح، ويمكن أيضًا استخلاصه باستخدام كبريتات دوديسيل الصوديوم وبروميد بيثيل تريميثيل الأمونيوم. هناك أيضًا تقنيات تعتمد على هلام السيليكا.

تقنية السائل السائل لاستخراج الحمض النووي

  • يمكن استخراج الحمض النووي الريبي (RNA) باستخدام تقنية السائل السائل. تعتبر هذه الطريقة من أكثر الطرق شيوعاً حيث أنها تستخدم بعض المحاليل المحضرة بالصيغ الكيميائية. تم إعداده خصيصًا لاستخراج الحمض النووي. حيث يكون الاعتماد الأساسي على حل التحليل.
  • ويمكن أيضًا تحضير محلول الفصل من محلول أو محلولين لأنه يتم استخدام العديد من المواد الكيميائية في تحضيره. بما أن الفينول سائل، فهو أحد أكثر المواد شيوعًا المستخدمة في استخراج الحمض النووي السائل.

إقرأ أيضاً:

  • هناك العديد من المواد الكيميائية المختلفة التي يمكن تحضير محلول الشطف بها، وهي لا تقتصر على الفينول فقط. يمكن أيضًا استخدام كحول الأيزواميل والكلوروفورم. وتتطلب جميع هذه المواد ما يعرف بطرق الطرد المركزي أو طرق الفصل.
  • بعد تحديد قابلية ذوبان جزيئات الحمض في المحاليل غير المتجانسة، يتم استخلاص الحمض النووي عن طريق فصلها. هذه الطريقة شائعة في طرق استخراج الحمض النووي السائل السائل المستخدمة في المختبرات.
  • ويستخدم الخبراء الفينول في هذه الطريقة لاستخراج الحمض النووي لأن الفينول يهضم البروتينات ويسهل عملية الاستخلاص. كحول الأيزواميل يشق الحمض النووي. الكلوروفوم يقلل من رغوة الطور البيني.
  • يتمتع PCI ببعض المزايا المهمة، أهمها أنه يمكنه فصل الحمض النووي من جميع الأنسجة ويمكن استخدامه مع جميع أنواع الخلايا الحيوانية والبكتيرية والنباتية، وعند استخدامه مع جوانيدين ثيوسيانات المتخصص فإنه يمكنه أيضًا فصل الحمض النووي الريبي (RNA). .

ختاماً. لقد شرحنا جميع المعلومات حول استخراج الحمض النووي الريبي (RNA) من عدة زوايا؛ حتى يتمكن الجميع من الاستفادة من هذه المعلومات الهامة.